CONTROL DE VARROASIS:
Investigaciones sobre tratamientos alternativos en el sur de España
Por J, M. Flores, J. A. Ruíz, J. M. Ruz, F. Puerta y F. Campano
Centro Andaluz de Apicultura Ecológíca
El CAAPE
El Centro Andaluz de Apicultura Ecológica (CAAPE) nace en 1986 fruto de la colaboración entre la Universidad de Córdoba, donde se venía trabajando en la línea de patología apícola y agroecología, y la Unión de Agricultores y Ganaderos de Andalucía (UAGA-COAG), que aporta el valioso factor humano: los apicultores, y la posibilidad de comprobar a gran escala los resultados obtenidos en los colmenares experimentales. Asimismo, se colabora muy estrechamente con el Centro de Investigación y Desarrollo Agrario (CIDA) de Córdoba, responsable del Plan Apícola Andaluz de la Consejería de Agricultura de la Junta de Andalucía.
La finalidad del CAAPE es el contacto directo entre los apicultores y la Universidad para, en un marco común y de una forma participativa, buscar soluciones a los problemas del sector(1), por supuesto, siempre desde la perspectiva de la apicultura como una actividad ecológica y plenamente integrada con el medio(2), y con las mayores garantías de calidad para el consumidor.
El hecho de que el Centro nazca bajo la denominación de apicultura ecológica(3) no pretende excluir la colaboración con los apicultores que no desarrollan este tipo de apicultura. Más bien, significa una apuesta de futuro para la obtención de productos de alta calidad y cuidada caracterización, evitando la amenaza de la estandarización, la adulteración y los residuos ambientales y sanitarios(4).
Una de las líneas de trabajo del CAAPE es el estudio de sustancias naturales alternativas a los productos químicos empleados en el tratamiento contra Varroa jacobsoni, que pueden presentar problemas de residuos(5 y 6) y resistencias por parte del parásito(7, 8 y 9).
Las dos etapas
En el conjunto de nuestras investigaciones podemos destacar dos etapas.
Etapa 1
En un primer momento, partimos de los productos alternativos más investigados a nivel internacional que estuviesen permitidos en agricultura ecológica por su inocuidad; de acuerdo a esto, nos dispusimos a estudiar el ácido fórmico, el timol y la rotenona(11, 12, 13, 14 y 15) (iniciamos la línea de trabajo de lucha contra Varroa, gracias a la financiación de un proyecto y a la creación de un grupo para investigar tratamientos naturales en apicultura por parte de la Consejería de Agricultura y Pesca de la Junta de Andalucía(10))
El primer problema con el que nos encontramos fue el tratar de definir la dosis y forma de administración de los productos, pues habían sido seleccionados en base a haber demostrado su eficacia en otras climatologías.
Sabíamos que en la evaporación o sublimación, forma mayoritaria de actuación de estas sustancias, la liberación del principio activo se encuentra mediatizada por dos parámetros:
• La temperatura interior de la colmena, que a su vez fluctúa dependiendo de la temperatura exterior.
• La naturaleza y dimensiones de la superficie de evaporación del dosificador utilizado.
El primer parámetro provoca que un mismo producto, a una dosis que ha tenido eficacia en una climatología determinada, no presente la misma con otras temperaturas ambientales.
El segundo provoca que un mismo producto, en una misma climatología, pueda tener eficacias distintas dependiendo de que se utilice un tipo de dosificador u otro.
Por todo ello, la metodología de nuestras investigaciones ha tenido tres niveles de actuación:
1- Ensayos en laboratorio y de evaporación: Su finalidad es estudiar las curvas de evaporación de los productos que se vayan a ensayar y el testaje de distintas sustancias con presumibles efectos acaricidas, para su selección y empleo en “2”.
2- Ensayos en apiario experimental: Tiene el objetivo de averiguar bajo qué forma de administración y dosis tienen las sustancias seleccionadas una más alta eficacia.
3- Ensayos en colmenares profesionales: Persigue demostrar a gran escala y comercialmente la eficacia de dichos tratamientos.
Pruebas de evaporación
Estas pruebas fueron realizadas en estufa y en colmenas Perfección y Dadant, sin abejas o con abejas según los casos.
El medio de administrar los productos fue en placas de petri y tubos de ensayo con distintas variantes de forma, tamaño y apertura. Una vez al día, las placas y los tubos se pesaban en una balanza de precisión para controlar la evolución de la disminución del peso de los mismos.
El ácido fórmico se diluyó al 85% y se vio que la evaporación fue más rápida en placas de petri que en tubos de ensayo. Las placas con mayor evaporación fueron las que tenían una mayor apertura y, en cuanto a los tubos, el de mayor evaporación es el de mecha, seguido del de esponja y del que no tiene evaporador ninguno.
El timol y la rotenona se administraron en cristal o en polvo en el caso del timol, y en polvo en el de la rotenona (mezcladas con azúcar).
El timol se sublimó mayormente en estufa que en colmena (sin abejas), donde la temperatura oscilaba a lo largo del día; en las placas de petri destapadas que en tubos de ensayo, donde la superficie de evaporación es mucho menor; y en cristal que cuando está molido. No hubo diferencias significativas en la sublimación en estufa en las distintas combinaciones o mezclas de timol con azúcar. Sin embargo, el ensayo en colmenas Perfección con abejas demostró que el timol se perdió más por el contacto con las abejas que por sublimación a una temperatura media algo menor que la de la estufa (32º C).
Respecto a la rotenona en polvo en colmenas con abejas, su pérdida tuvo lugar con mucha más lentitud que el timol siendo algo mayor cuando estuvo mezclada con azúcar en polvo que en las otras combinaciones.
Ensayos en apiario experimental
En función de las pruebas anteriores, optamos por aplicar:
• Ácido fórmico en una placa conteniendo una esponja impregnada, sin tapadera, junto a un dosificador regulable diseñado por el equipo que realizó el proyecto(16).
• Timol en polvo, sobre los cuadros, ya que no presentaba problemas de evaporación.
• Rotenona en solución impregnada en tablillas de madera a distintas dosis, ya que la rotenona en polvo presentaba problemas de asfixia para las abejas, además de su lenta pérdida.
Se usaron colmenas Perfección con trampillas caza-Varroa en las que cada 4 días se introducían cartulinas impregnadas con vaselina para cuantificar las Varroas que morían. Se aplicaron dos tratamientos con productos alternativos y un tratamiento con 1 centímetro cúbico de clorfenvinfós en tablilla por la piquera como control. Hubo 8 días de intervalo entre cada uno de los tratamientos y se recogieron cartulinas hasta 16 días después del tratamiento control. La duración total del ensayo fue de 32 días.
El ácido fórmico aplicado en placa abierta (20 ml, 85% ingrediente activo (i. a.)/colmena) durante los meses de febrero-marzo, arrojó una eficacia entorno al 40%, y una eficacia aún menor si se aplicaba con el otro dosificador en los meses de noviembre a enero.
El timol fue el que mostró mayor eficacia, entorno al 85% de la Varroa murió en el tratamiento; mientras que la rotenona en tablillas alcanzó el 83% cuando se utilizaron 4 tablillas por colmena impregnadas en una solución de rotenona que contenía el producto a una riqueza del 24% (ver figura 1).
FIGURA 1
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FÓRMICO
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TIMOL
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ROTENONA
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ENSAYO 1
(Nov-Enero)
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Dosificador
de mecha
(20ml, 85% i. a.) |
1 gr. de polvo
por cuadro
con abejas |
2 Tablillas
impregnadas
(6% i. a.) |
ENSAYO 2
(Feb-Marzo)
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Placa con
Eesponja
(20ml, 85% i. a.) |
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1 gr. de polvo
por cuadro
con abejas |
ENSAYO 3
(Mar-Abril)
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4 Tablillas
impregnadas
(2% i. a.) |
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Pruebas en colmenas comerciales
En función de estos resultados se diseñaron las pruebas en colmenares comerciales, optando por estas 6 formas y dosis:
• Ácido fórmico
a) En líquido, en placa de petri con esponja abierta en un cuadrante de 90º, 20 ml de producto / colmena (85% i. a.). Optamos por una placa semi-abierta, en vez de completamente abierta, porque la época en la que se iba a realizar el ensayo con los apicultores presentaba temperaturas superiores a la de los ensayos en el colmenar experimental.
b) En líquido, en dosificador de tubo, 20 ml de producto por colmena (85% ingrediente activo).
 • Timol
a) En polvo, sobre los marcos de los cuadros, a 1 gramo por cuadro de abejas.
b) En polvo, contenido en placa de petri destapada a 10 g (al 50% con azúcar) por colmena.
Imagen.
Ensayo de la aplicación del timol en polvo sobre los cuadros.
• Rotenona
a) En líquido, en tablillas, 4 tablillas impregnadas (24% i. a. por colmena).
b) En polvo, 1% i. a., en placa de petri destapada, a 10 g (al 50% con azúcar) por colmena. (Esta modalidad se quiso ensayar por probar una forma distinta de aplicación cuando la temperatura iba a ser mayor, ya que los ensayos con los apicultores se realizaron en septiembre).
El problema que presentaron estas pruebas es que los niveles de Varroas presentes en los colmenares comerciales eran tan bajos que los resultados obtenidos de eficacia no fueron significativos. Por razones que desconocemos, la caída de Varroa por colmena no superó las 30 Varroas, incluyendo la Varroa caída con el tratamiento alternativo y la caída con el tratamiento químico, la cual es una cifra demasiado reducida (figura 2).
FIGURA 2
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F1: Ácido fórmico con dosificador de mecha (20 ml, 85 % de ingrediente activo).
F2: Ácido fórmico en placa con esponja (20 ml, 85 % de ingrediente activo).
T1: Timol en polvo (1 g por cuadro de abejas) sobre los cuadros.
T2: Timol en polvo (1 g por cuadro de abejas) en placa (50% azúcar).
R1: 4 tablillas impregnadas en solución al 24% i. a.
R2: 5 g en polvo + 5 g de azúcar (en placa). |
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Conclusiones de la primera etapa
• De los tres tipos de ensayos, las pruebas en colmenares comerciales no arrojaron resultados útiles por el escaso número de Varroas presentes en las colmenas de los apiarios en septiembre de 1996 –algo imprevisible–. No obstante, la investigación-acción participativa como metodología de trabajo empleada en este proyecto nos pareció muy positiva a la hora de abordar los problemas más acuciantes de la apicultura y del desarrollo rural en general.
• Las tres sustancias ensayadas ofrecieron resultados esperanzadores, sobre todo el timol. Las diferencias encontradas en cuando a eficacia pueden atribuirse en muchos casos a la forma de aplicación, o la época del año en que se aplicó, más que la efectividad en sí de la molécula ensayada. Por ello, se vio conveniente ensayar nuevas dosis y formas de aplicación de las tres sustancias ensayadas.
• Importantes interrogantes y cuestiones quedaron sin resolver en esta primera etapa de trabajo. Algunas de ellas fueron:
a) el estudio de la caída natural de la Varroa en las colmenas tratadas,
b) el posible efecto de la vaselina sobre dicha caída,
c) el efecto físico del polvo sobre la caída de la Varroa en aquellos tratamientos administrados en tal estado,
d) la mortalidad de las abejas y la infertilidad de la reina con estos tratamientos,
e) los residuos que pudieran persistir en miel y cera, y
f) la influencia de la forma de presentación, el modo de administración y la dosis de estos productos en la eficacia de los tratamientos.
Etapa 2
Esta etapa se inició en 1997 y sus resultados se deben considerar todavía provisionales (la nota final del artículo ofrece además una breve visión de los estudios que se están llevando a cabo en este año 99).
Ensayos en laboratorio
 El objetivo propuesto en este caso es el de prevenir la resistencia de Varroa jacobsoni a las sustancias acaricidas naturales, con la consiguiente sobredosificación de estos productos y el posible acúmulo de sus residuos en la miel y la cera, tal como ocurre con los productos químicos de síntesis. Por ello, nos hemos planteado el testaje a nivel de laboratorio de una serie de plantas o sustancias naturales de reconocido poder acaricida.
Imagen.
Materiales para el testaje de sustancias en el laboratorio.
Dicho testaje se está realizando en recipientes de observación, que consisten en un vaso modificado, en el que se coloca una esponja que ajuste bien en su fondo. En la esponja el producto a testar se embebe primero y se deja evaporar después. Este recipiente se coloca de modo invertido con 10 abejas en su interior (cada una de ellas por lo menos con un ácaro) sobre una malla que impide que se escapen las abejas pero que permite la caída de la Varroa sobre una cartulina impregnada en vaselina. En la parte inferior del vaso se coloca un tubo alimentador para permitir que las abejas sobrevivan el máximo tiempo posible. Al finalizar se cuentan las abejas y los ácaros muertos. La sustancia a experimentar no sólo se puede aplicar por evaporación, sino también por pulverización, espolvoreo, ingestión o introduciendo tiras portadoras(17) (foto 4).
Durante todos los ensayos se trabaja en una cámara isoterma a 35º C, temperatura similar a la existente en el área de cría en una colmena.
Las plantas o sustancias con efectos acaricidas, según la bibliografía consultada(18, 19 y 20), que han sido seleccionadas y se están ensayando son las siguientes:
• Knautia arvensis (escabiosa).
• Chrysanthemum cinariaefolium (piretro).
• Tanacetum vulgare (tanaceto).
• Ruta graveolens (ruta).
• Phumbago europaea (belesa).
• Scrofularia canina.
• Inhula viscosa (olivarda).
• Equisetum arvense (cola de caballo).
• Urtica dioica o urens (ortiga).
• Delphinium staphisagria (hierba piojera).
• Nicotiana tabacum (nicotina).
Estas sustancias se están ensayando en un primer momento por evaporación, a partir de tintura madre en solución hidroalcohólica, elaborada con una sola cepa de la especie en cuestión. Cada sustancia se prueba a tres dosis diferentes y el número de ensayos repetitivos para cada una de ellas es al menos de 5.
Ensayos en el apiario experimental
Por los ensayos realizados durante la primavera de 1997 hemos podido resolver algunas de las cuestiones o interrogantes que quedaron pendientes en la primera etapa del proyecto:
a) En cuanto a la caída natural de la Varroa en las colmenas tratadas, hemos encontrado que puede oscilar entre 16 y 32 %, con una media de 21,77%.
b) No se ha observado efecto alguno de la vaselina en la retención de la Varroa sobre la cartulina, es decir, la eficacia de los productos ensayados no está incrementada porque la vaselina contribuya a matar la Varroa caída. Tanto en el grupo de colmenas testigo, como en las que se trataron con ácido fórmico, timol y rotenona, se pusieron fondos con vaselina y sin ella, siendo tres frente a dos los casos en que el porcentaje de Varroa caída sin vaselina era mayor que el de la caída con vaselina.
c) La mezcla de timol y azúcar al 50%, a razón de 1 g por cuadro de abejas, dispuesto sobre el marco de los cuadros, tuvo una eficacia del 79%, mientras que el tratamiento con timol al 100% tuvo una eficacia del 95%, y la colmena control tratada con azúcar tuvo una eficacia del 17%.
d) En cuanto al efecto de los tratamientos sobre la viabilidad de las colmenas, hemos constatado que la evolución de las colmenas tratadas se adapta en general a las que tuvieron las colmenas testigo. Esto, lo hemos podido controlar anotando el número de cuadros de alimento, cría y población, así como el peso de las 18 colmenas usadas en el ensayo (2 testigo, 4 para ácido fórmico, 10 para timol y 4 para rotenona), inmediatamente antes y después del tratamiento. Todas las colmenas ganaron peso de modo similar a como lo hicieron las testigo, tan solo 3 colmenas tratadas con timol perdieron peso (2 kg como máximo) y 2 colmenas perdieron su reina, una de ellas tratadas con fórmico y otra con timol.
e) Por razones técnicas, ningún laboratorio ha podido analizar, hasta la fecha, los residuos que pudieran persistir en miel y cera de estas sustancias.
f) Respecto a la influencia de la forma de presentación, el modo de administrar los productos y la dosis en la eficacia de los tratamientos, tenemos que apuntar que:
– La eficacia del tratamiento con ácido fórmico mediante dosificador en placa dispuesto en el agujero de la entretapa, a razón de dos administraciones de 30 ml con 8 días de intervalo fue del 45%, mientras que dos administraciones de 1 plancha Milben-Platten de ácido fórmico, con 14,2 g de ácido fórmico anhídrido, tuvo una eficacia de 32%.
– El timol en polvo tuvo una eficacia media del 97%, mediante dos administraciones de 10 g en placa de petri destapada sobre el marco de los cuadros, mientras que si la placa estaba dispuesta con una tapa con agujeros a donde no podían acceder las abejas, la eficacia fue sólo del 27%. Mediante dos administraciones de 15 g de timol en polvo disuelto en 20 ml de alcohol de 70º y rociado sobre tablillas de chopo también se obtuvo una elevada eficacia (95%). Probamos asimismo aceite esencial de tomillo a razón de dos administraciones de 24 ml en dosificador de placa y 18 ml en tablillas de chopo, consiguiendo una eficacia de 60 y 64% respectivamente.
– Finalmente, con la rotenona obtuvimos una eficacia media del 66% cuando tratamos mediante dos administraciones de 8 tablillas de chopo que habían estado sumergidas 24 horas en una solución de rotenona con el 24% de ingrediente activo.
Ensayos en colmenares profesionales
Según los resultados de nuestro anterior proyecto y los resultados de los ensayos en curso del presente proyecto se tratarán tres colmenares de apicultores profesionales, con 30 colmenas cada uno, en el otoño de 1997 y la primavera de 1998.
Agradecimientos.
Las investigaciones aquí reseñadas están financiadas por la Consejería de Agricultura y Pesca de la Junta de Andalucía a través del proyecto “Evaluación de sustancias alternativas y de características de resistencia natural a la varroasis en colmenas de Apis mellifera en Andalucía” y de la creación del grupo mixto "Control sanitario en apicultura mediante vías alternativas a la utilización de productos químicos de síntesis" (según Resolución de 3 de agosto de 1995. BOJA núm. 128, página núm. 9.752, Sevilla, 3 de octubre de 1995).
Últimas experimentaciones
ÚLTIMAS EXPERIMENTACIONES.
Actualmente, el grupo de investigadores que en el CAAPE trabajan en el estudio de tratamientos naturales para controlar la Varroa, han restringido los productos a ensayar exclusivamente al timol. Ello se ha debido a los buenos resultados obtenidos con esta sustancia. El reto está ahora en encontrar una forma de aplicación que vaya liberando de forma homogénea el producto, de modo que la dosis de timol no sea muy elevada en los primeros días, y después decrezca paulatinamente. Estos son los problemas de la aplicación del timol en polvo sobre los cuadros, una pauta actualmente deshechada por completo por nuestro grupo, y que no recomendamos.
En su lugar, empleamos una solución oleosa de timol que impregna un material poroso, que se coloca encima de los cabezales de los cuadros. Los principales problemas que debemos resolver es ajustar la cantidad de timol usada en este dispositivo en función de las temperaturas exteriores. El grupo ha recibido nueva financiación para continuar con estas investigaciones a través del Plan Apícola Nacional (Proyecto API98-003) y la Junta de Andalucía (Programa de Concertación 1999).
BIBLIOGRAFÍA
(1) Tillamann, H.J. y salas, M. A. (1994). Nuestro congreso: Manual de Diagnóstico Rural Participativo. Prodaf-Gtz. Santiago de Puriscal. Costa Rica. ISBN: 9986-9764-0-7.
(2) Socorro, o. Arrebola, m. l. (1994). Las abejas y su colaboración en la conservación de la naturaleza. Andalucía Natural 5, diciembre.
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(9) Colombo, M., Lodesani, M. y Spreafico, M. (1994). Resistencia de la Varroa al fluvalinato. Vida Apícola 64: 42-47.
(10) Dirección General de Investigación Agraria. Consejería de Agricultura y Pesca de la Junta de Andalucía. Evaluación de sustancias alternativas y de características de resistencia natural a la varroasis en colmenas de Apis mellifera de Andalucía. Resolución de 3 de agosto 1995. BOJA núm. 128, página núm. 9.752, Sevilla, 3 de octubre de 1995.
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(14) Chiesa, F. (1991). Effective control of varroatosis using powdered thymol. Apidologie 22: 135-145.
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